Evaluación de tres dietas alimentarias para el período larval de Aedes aegypti en condiciones de laboratorio / Assessment of three feeding diets for the Aedes aegypti larval stage under lab conditions

Introducción: la alimentación en el período larval del mosquito es sumamente importante, debido a que en esta etapa almacenan los nutrientes básicos para el desarrollo de la pupa y el adulto. Objetivo: evaluar la calidad de tres dietas como fuente nutritiva y su influencia en el desarrollo de las fases preadultas de Aedes aegypti. Métodos: se evaluaron tres dietas en el insectario del Instituto Pedro Kourí, concentrado CENPALAB, elaborado en el Centro para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB), levadura torula, subproducto de la caña de azúcar (ambas de producción nacional) y harina de pescado, producto de importación. Previamente, se determinó la calidad higiénica-microbiológica y química nutricional de las dietas. Se evaluaron variables biológicas como el número de pupas diarias por alimentos y la duración del ciclo larval; se determinó la cantidad de proteínas presentes en las larvas alimentadas con cada dieta, mediante el método de Lowry. Resultados: la calidad higiénica-microbiológica, así como la caracterización química nutricional de los 3 alimentos evaluados, aportaron resultados satisfactorios para el desarrollo de la investigación. Los valores mayores en la concentración de proteínas y en la actividad biológica en la fase larval del mosquito se obtuvieron con la harina de pescado. No se encontraron diferencias significativas en la concentración de proteínas entre las dietas en los primeros días del período larval, A partir del quinto hasta el séptimo día de vida, la harina de pescado fue superior al concentrado CENPALAB. La emergencia de pupas comenzó al sexto día para todas las dietas, obteniéndose el pico más alto al séptimo día con diferencias entre estas. El ciclo larval duró de 7 a 8 días. Conclusiones: se sugiere la utilización de las dietas de producción nacional en situaciones que lo requieran por carencia de la dieta importada, para no detener el desarrollo de las investigaciones

Introduction: feeding mosquitoes during the larval stage is an important process, since it is the stage in which basic nutrients are stored for the subsequent development of pupas and adults. Objective: to evaluate both the quality of three diets as nutritional source and the influence these diets have on the development of the Aedes aegypti in its pre-adult stage. Methods: three different diets were evaluated at the Insectarium of the Pedro Kourí Tropical Medicine Institute in Havana, Cuba. The diets evaluated were: CENPALAB Food Concentrate, elaborated at the Center for Laboratory Animal Production (CENPALAB, Spanish acronym) and torula yeast, a sugar cane byproduct (both of them from domestic production) as well as fish flour, an imported product

Fenotipo antenal de dos especies cubanas del complejo flavida: Triatoma flavida y Triatoma bruneri (Reduviidae: Triatominae) / Antennal phenotype of two Cuban species of flavida: Triatoma flavida y Triatoma bruneri (Reduviidae: Triatominae) complex

INTRODUCCIÓN: el fenotipo antenal ha mostrado ser una herramienta útil para la comparación taxonómica entre especies de Triatominae. OBJETIVO: estudiar el fenotipo antenal en adultos de T. flavida y T. bruneri para clarificar el estado taxonómico de estas especies así como conocer la adaptación específica de cada una a su hábitat. Métodos: fueron contadas y analizadas 4 tipos de sensilla: bristles (BR), tricoide de pared fina (TPF), tricoide de pared gruesa (TPG) y basicónica (BA). RESULTADOS: el pedicelo de T. flavida mostró solamente 2 tipos de receptores mientras que T. bruneri tuvo un mayor número de quimiorreceptores de 3 tipos diferentes. Entre las hembras de T. flavida y T. bruneri fueron observadas diferencias en los BR y BA, para los machos las diferencias fueron observadas en los receptores TPF, TPG y BA sobre el pedicelo y en los BR, TPG y BA en el flagelo 1. El análisis discriminante permitió la separación de las 2 especies, sin embargo, en el análisis de acuerdo con el sexo no se observaron diferencias. CONCLUSIONES: como consecuencia de la adaptación de cada especie a su hábitat se observaron modificaciones morfológicas en el fenotipo antenal. Futuros estudios a los niveles ecológico, morfométrico y molecular son necesarios para clarificar el estado taxonómico de estas especies.

INTRODUCTION: the antennal phenotype has proven to be a useful tool for the taxonomic comparison between Triatominae species. OBJECTIVE: to study the antennal phenotype in adults of T. flavida and T. bruneri adults to clarify the taxonomic status of these species as well as to learn about the specific adaptation of each of them to its habitat. METHODS: four types of sensilla were counted and analyzed: Bristles (BR), thin walled trichoidea (TH), thick walled trichoidea (TK) and basiconic (BA). RESULTS: the pedicel of T. flavida showed only two different types of receptors whereas T. bruneri males had a greater number of chemoreceptors of three different types. Among T. flavida and T. bruneri females, there were differences in BR and BA; differences in males were found in the receptors TH, TK and BA on the pedicel and BR, TK and BA in the flagellum 1. Discriminatory analysis allowed the separation of the two species; however, the analysis by sex did not show any difference. CONCLUSIONS: as a consequence of the adaptation of each species to its habitat, morphological changes of the antennal phenotype occurred. So, further studies at ecological, morphometric and molecular levels are needed to make their present taxonomic status clear.

Variabilidad genética de poblaciones de Triatoma flavida (Hemiptera: Reduviidae) en la península de Guanahacabibes / Genetic variability of Triatoma flavida (Hemiptera: Reduviidae) in Guanahacabibes

La enfermedad de Chagas es una enfermedad transmitida por triatomineos. Triatoma flavida es una especie selvática autóctona de Cuba, que presumiblemente es atraída a las casas por la luz, de las especies encontradas en Cuba es la más abundante. Se investigó la variabilidad genética intrapoblacional e interpoblacional de ejemplares de T. flavida colectados en la región occidental de Cuba, utilizando la técnica del ADN polimórfico amplificado al azar, con la determinación ademßs de posibles relaciones genéticas entre las poblaciones. Un total de 10 cebadores al azar (OPA-1 al 10) fueron usados para evaluar la variabilidad genética dentro de una población y entre 9 poblaciones diferentes de T. flavida, mediante la técnica de ADN polimórfico amplificado al azar. Además, se evaluó la diversidad genética entre individuos salvajes y de la primera generación (F1) obtenidos en el laboratorio, así como entre los diferentes estadios de esta especie. No se detectaron diferencias en los patrones de amplificación del ADN entre los individuos silvestres y de la F1; al igual que entre los diferentes estadios de esta especie. Se encontró homogeneidad genética dentro de la población estudiada y una variabilidad genética baja entre las diferentes poblaciones de T. flavida. Se obtuvieron 2 grupos bien definidos según el análisis del ADN polimórfico amplificado al azar, mostrando concordancia con el origen geográfico, en las poblaciones capturadas en áreas del occidente y el oriente de Guanahacabibes, Pinar del Río. Entre estas poblaciones se encontró una pequeña diferenciación genética (Fst 0,030) y tasas de migración (N> 1) que revelan flujo genético y homogeneidad genética. Los resultados presentados en este estudio establecen una aproximación a la estructura genética de T. flavida. La homogeneidad genética encontrada entre los individuos silvestres de T. flavida constituye un aspecto importante para la implementación de las políticas de control de este vector.

Chagas disease is a Triatomineos-borne disease. Triatoma flavida is an indigenous Cuban species, presumably attracted to houses by light and it is the most abundant species in the country. The intrapopulatinal and interpopulational genetic variability of T. flavida collected in the western region, using the Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) technique, thus determining possible genetic relationships among the populations. A total of ten random primers (OPA-1 at the 10) were used to evaluate the genetic variability in one population and among 9 populations of T. flavida using the RAPD technique. We also evaluate the genetic diversity among wild individuals and their first generation (F1) obtained in the laboratory as well as different stages of this species. Differences were not detected in the amplification patterns among the wild individuals and the F1. The same results were achieved among different life cycles of this species. Genetic homogeneity of the studied population and low genetic variability among different T. flavida populations were observed. Two well-defined groups were obtained according to random amplified polymorphic DNA data; they matched with the geographical origin in the populations captured in areas from east and west of Guanahacabibes, Pinar del Río. Among these populations, small genetic differentiation (Fst 0,030) was found as well as migration rates (N> 1), which reveals the gene flow and genetic homogeneity. The results of this study constitute an approach to the genetic structure of T. flavida. The genetic homogeneity between wild individuals of T. flavida represents an important item for the implementation of the vector control programs.

Morphometric changes of Triatoma flavida Neiva, 1911 (Hemiptera: Triatominae) in the transition from sylvatic to laboratory conditions

The one-generational metric changes occurring in Triatoma flavida (Hemiptera: Triatominae) when carried from its wild habitat (caves) to laboratory, were examined using traditional morphometric techniques. As for other species of Triatoma, Rhodnius or Panstrongylus studied in similar conditions, a significant reduction of head, thorax and wing size was observed. Sexual dimorphism of the wings, while present in the wild sample, was not detected anymore in the laboratory individuals. Biological significance and epidemiological importance are discussed.

Fueron examinados los cambios morfométricos que ocurrieron en la primera generación de Triatoma flavida cuando fueron llevados desde su hábitat selvático (cuevas) al laboratorio, mediante el uso de técnicas morfométricas tradicionales. Se observó una reducción significativa del tamaño de la cabeza, tórax y alas, como ocurre en otras especies de Triatoma, Rhodnius o Panstrongylus estudiados en condiciones similares. El dimorfismo sexual de tamaño en las alas, aunque presente en los individuos selváticos, no se detectó en los de laboratorio. La significación biológica y la importancia epidemiológica son discutidas.

Conducta de oviposición de Aedes aegypti (L.) en presencia de Macrocyclops albidus (J.) y Bacillus thuringiensis var. israelensis en condiciones de laboratorio / Conduct of the oviposition of Aedes aegypti (L.) in the presence of Macrocyclops albidus ( J.), and Bacillus thuringiensis var. israelensis under lab conditions

Se evaluó la conducta de oviposición de hembras grávidas de Aedes aegypti en presencia de los agentes biológicos: Macrocyclops albidus (Copepoda: Cyclopoidea) o Bacillus thuringiensis var. israelensis (Bti) en condiciones de laboratorio. Se colocaron recipientes con 225 mL de agua declorada para la puesta de huevos con 3 variantes: agua con copépodos, agua con Bti y agua. El promedio de huevos depositados en los recipientes con copépodos y Bti fueron de 1 227,9 y 1 200,8 respectivamente, superiores al de 887,4 huevos del recipiente que contenía solo agua, aunque las diferencias observadas no fueron estadísticamente significativas (p> 0,05). Los Indices de la Actividad de Oviposición (IAO) calculados mostraron valores mayores que 0 para copépodos y para Bti, indicando que las hembras no evitaron ovipositar en estos recipientes. Los resultados sugieren que en la naturaleza los recipientes que contienen estos controladores biológicos pudieran constituir sitios para la oviposición de hembras grávidas de Aedes aegypti, lo que tendría implicaciones positivas en su eficacia para controlar este vector.

The behaviour of the oviposition of pregnant females of Aedes aegypti in the presence of biological agents: Macrocyclops albidus (Copepoda: Cyclopoidea) or Bacillus thuringiensis var. israelensis (Bti) was evaluated under lab conditions. Recipients containing 225 mL of dechlorinated water were placed for oviposition with three variants: water with copepods, water with Bti, and water. The average of eggs layed in the recipients with copepods and Bti were 1 227.9 and 1 200.8, respectively, a figure higher than the 887.4 eggs of the recipient containing only water, although the differences observed were not statistically significant (p >0.05). The Oviposotion Activity Index (OAI) estimated showed values over 0 for copepods and for Bti, which indicated that females did not avoid to deposit their eggs in these recipients. The results suggested that in nature, these recipients with biological controllers may be oviposition sites for pregnant females of Aedes aegypti, which may have positive implications on its effectiveness to control this vector.

Macrocyclops albidus (Copepoda: Cyclopidae): una nueva alternativa para el control de larvas de mosquitos en Cuba / Macrocyclops albidus (Copepoda: Cyclopidae): a new alternative for the control of mosquito larvae in Cuba

Se evaluó el copépodo ciclópodo Macrocyclops albidus como agente de control biológico sobre larvas de Aedes aegypti y Culex quinquefasciatus, culícidos que frecuentemente conviven en recipientes de uso doméstico en zonas urbanas. Los experimentos se realizaron en condiciones controladas de laboratorio. Se utilizaron recipientes plásticos con 5 L de agua declorada y 3 g de hojas secas. Se agregaron 2 densidades de copépodos y 3 combinaciones de densidades de larvas. Se hicieron 5 réplicas. El conteo de las larvas sobrevivientes y los copépodos recuperados se realizó 6 dias después de comenzado el experimento. Se observó una marcada reducción de la población larval de mosquitos en todos los tratamientos con copépodos, destacándose su preferencia por las larvas de Ae aegypti, que no fue afectada por la presencia de larvas de Cx quinquefasciatus. Los copépodos mostraron alta supervivencia en todas las variantes ensayadas, siendo esta mayor que 100 por ciento cuando se agregaron en la menor densidad

Efecto patogénico de 3 nematodos parásitos en larvas de Aedes aegypti en condiciones de laboratorio, en Cuba / Pathogenic effect of 3 parasitic nematodes in Aedes aegypti larvae under laboratory conditions in Cuba

Se evaluó el efecto patogénico de 3 nematodos parásitos Romanomermis culicivorax Ross y Smith, 1976, Romanomermis iyengari Welch, 1964 y Strelkovimermis spiculatus Poinar y Camino, 1986, a diferentes dosis de aplicación, en larvas de Aedes aegypti Linnaeus, 1762. Para cada unidad experimental se utilizaron 100 larvas de II estadio de este mosquito y se infestaron con nematodos preparasíticos de las 3 especies, en proporciones de 3:1, 5:1, 10:1, 15:1 y 20:1. Las medias de infestación y las tasas de parasitismo aumentaron en la medida en que se incrementaron las dosis. A bajas densidades de nemátodos (3 y 5 nemátodos/larva) R culicivorax resultó ser más efectivo al compararla con las otras especies, sin embargo con una proporción de 10:1 todos los nemátodos rovocaron 100 por ciento de mortalidad, siendo S spiculatus el nemátodo que provocó las medias de infestación más altas. Por esta razón, una proporción de 10:1 pudiera ser recomendada para que estos nematodos sean evaluados en condiciones naturales en recipientes artificiales no útiles como una alternativa biológica para el control de Aedes aegypti

Evaluación de Macrocyclops albidus (J.) para el control larval de Aedes aegypti (L.) bajo condiciones de laboratorio en Cuba / Evaluation of Macrocyclops albidus (J.) for the Aedes aegypti (L.) larval control under laboratory conditions in Cuba

Se realizaron colectas en 4 localidades del país, con el propósito de evaluar la capacidad depredadora de copépodos ciclópodos sobre larvas de Aedes aegypt (L.), los especimenes fueron identificados como Macrocyclops albidus (J.) (Copepoda: Cyclopoida). Bajo condiciones de laboratorio, se evaluó la capacidad depredadora de un copépodo al cabo de 24 h sobre 50 larvas recién eclosionadas en placas de Petri; también se probaron diferentes densidades de copépodos (25, 50, 100) ante 300 larvas, en recipientes plásticos. Ma. albidus demostró ser un depredador activo de larvas de Ae. aegypti, con una media de depredación de 23,51 a las 24 h. La densidad de 25 copépodos por recipiente resultó insuficiente para lograr un buen control con altas densidades larvarias (media de supervivencia larvaria= 20,9), con 50 copépodos se logró una reducción significativa de larvas (media= 7) y mediante la prueba Duncan (p< 0,01) se demostró que la cantidad de 100 copépodos fue suficiente para depredar la casi totalidad de las larvas con una media= 1,4. Se recomendaron estudios posteriores para evaluar la eficacia de los copépodos como agentes de control biológico en condiciones naturales.

With the purpose of evaluating the predatory capacity of cyclopoid copepods on larvae of Aedes aegypti (L.), collections were made in four localities of the country. The specimens were identified as Macrocyclops albidus (J.) (Copepoda: Cyclopoida). Under laboratory conditions, the predatory capacity of a copepod was evaluated after 24 hours on 50 larvae newly hatched in Petri´s plates. Different copepods densities were also tested (25, 50, 100) on 300 larvae in plastic recipients. Ma. albidus showed to be an active predator of Ae. aegypti larvae with a predatory mean of 23.51 at 24 hours. The density of 25 copepods for recipient was insufficient to achieve a good control with high larvae densities (mean larvae survival = 20.9). A significant reduction of larvae was achieved (survival mean = 7) with 50 copepods by Duncan´s test (p <0.01). It was demonstrated that 100 copepods was enough to depredate almost the totality of the larvae with a mean = 1.4. Further studies were recommended to evaluate the effectiveness of the copepods as agents of biological control under natural conditions.

Comparación morfológica e histológica del tubo digestivo de Gambusia puncticulata y Girardinus metallicus (Cyprinodontiformes: Poeciliidae), peces utilizados en el control biológico de mosquitos / Morphological and histological comparison of the digestive tract of Gambusia puncticulata and Girardinus metallicus, fishes used in the biological control of mosquitoes

Se describió y comparó la morfología e histología del tubo digestivo de Gambusia puncticulata y Girardinus metallicus, peces utilizados en el control biológico de larvas de mosquitos en Cuba, y se relacionó con los hábitos alimentarios de cada especie. Gambusia puncticulata tiene un intestino corto y grueso, característico de las especies carnívoras y Girardinus metallicus posee un intestino alargado y delgado arrollado en forma de espiral como corresponde a los peces omnívoros. Se observó que el patrón histológico del intestino en ambas especies es muy simple, sin embargo, Gambusia puncticulata presentó gran cantidad de microvellosidades de tipo ramificadas, al compararla con Girardinus metallicus, lo que aumenta de esta forma el rendimiento digestivo de su relativamente más corto, tubo digestivo